试验前准备,检查设备整体状态,确认刀架、手轮、样品夹、进给机构动作顺畅,紧固部位无松动,清洁机台残留石蜡碎屑。准备包埋好的组织蜡块、切片刀、毛笔、镊子、展片台、载玻片。将切片刀安装固定在刀架上,锁紧固定旋钮,调整刀的角度,刀刃保持锋利无缺口。修整蜡块,用刀片削去蜡块表面多余石蜡,暴露组织切面,保证组织表面平整,去除表面氧化、松散的蜡层。
装夹蜡块,将蜡块固定在样品夹内,拧紧夹具,蜡块切面与刀刃保持平行。转动手轮,将蜡块移动至靠近刀片位置,预留合适的切片间隙,注意不要让蜡块直接触碰刀刃,防止崩口。粗调进给,缓慢转动进给旋钮,逐步将蜡块推向刀片,目视观察,直到蜡块切面接近刀刃。
粗修切片,双手平稳转动大手轮,带动蜡块上下往复运动,同时配合进给旋钮,切去表层蜡质与多余组织,直到完整的组织面均匀暴露。粗修阶段切片厚度可以设置偏大,快速修平切面,收集的粗修蜡片直接丢弃,不可用于制片。粗修完成后,将切片厚度调至目标数值,常规石蜡切片多设置4至5微米。
正式切片,匀速单向转动手轮,蜡块随轮转上下移动,每转动一周,样品自动向前进给一个设定厚度,刀刃切下薄片。使用毛笔轻轻托住切片,避免切片褶皱、撕裂,连续切取完整蜡片。如果切片出现卷片、破碎、厚薄不均,暂停操作,检查刀刃、蜡块温度、样品夹紧情况,调整后再继续。选取形态完整、无褶皱的切片,轻柔转移至温水展片台,展平石蜡切片。
捞片与收尾,将展平的切片用洁净载玻片捞取,做好标记,放置备用。切片完成,停止转动手轮,松开样品夹,取下剩余蜡块,松开刀架固定旋钮,小心取出切片刀。清理机台,毛刷清扫所有石蜡碎屑,擦拭设备工作台,妥善收纳切片刀,刀刃保护好,防止磕碰损伤。
操作注意事项,切片刀刃锋利,操作过程手指不要正对刀口,避免割伤。转动手轮保持匀速,动作不能过猛,防止切片厚薄波动或者损坏刀体。蜡块温度需要合适,温度过高切片容易卷曲,温度过低蜡块过硬容易碎裂。不要用手直接触摸刀刃,清洁刀片使用软纸,单向擦拭。设备长期不用,清理干净后做好防尘保护。每次切片结束,记录样品编号、切片厚度以及设备运行情况。